關(guān)鍵詞:內(nèi)皮細胞培養(yǎng)|實驗技術(shù)服務(wù)
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內(nèi)皮細胞培養(yǎng)|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
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測序?qū)嶒灹鞒蹋?br> 1.干粉培養(yǎng)基原倍液的配制
1）配制過濾除菌的細胞培養(yǎng)基
①閱讀培養(yǎng)基使用說明，確定需要添加何種添加劑（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES等）。
②根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下整理并入容器。加注射用水至總體積的95%，輕微攪拌溶解。
③加入規(guī)定量的碳酸氫鈉及所要添加的物質(zhì)。
④輕微攪拌溶解，加注射用水至規(guī)定體積。
⑤用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值。
⑥用0.22μm濾膜正壓過濾除菌。
⑦溶液應(yīng)在2℃～8℃下避光保存。
2.配制可高壓滅菌細胞培養(yǎng)基
①根據(jù)所需將培養(yǎng)基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）將袋內(nèi)殘留培養(yǎng)基洗下，并入容器。加注射用水至總體積的95%，輕微攪拌溶解。
②在121℃、15psi下滅菌15分鐘。
③待溶液冷卻至室溫，加入無菌0.2mol/LL-谷氨酰胺溶液規(guī)定體積、無菌7.5%（w/v）碳酸氫鈉溶液規(guī)定體積，加注射用水（20℃～30℃）至規(guī)定體積，混勻。
④如果必要，用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至所需值。
⑤溶液應(yīng)在2℃～8℃下避光保存。